Polylinker

Ein Polylinker oder auch Multiple Cloning Site (MCS) ist ein künstlich geschaffenes DNA-Oligonukleotid aus rund 50bp, welches in ein Plasmid eingesetzt wurde und dessen Sequenz direkt hintereinander verschiedene Restriktionsschnittstellen für Restriktionsendonukleasen enthält.

Der Polylinker bietet die Möglichkeit, mit Hilfe von Restriktionsenzymen Fremd-DNA in das Plasmid einzubauen. Er liegt in einem Bereich, der keine essentielle Funktion für das Plasmid hat. Der wiederholte Einbau von Fremd-DNA an derselben oder nahezu selben Stelle ist möglich.

Polylinker ermöglichen ein flexibles Klonieren, da aus den verschiedenen Restriktionsschnittstellen die jeweils am besten passenden ausgewählt und verwendet werden können. Die Schnittstellen sind dabei einzigartig (unique) auf dem Vektor und sollten auch innerhalb des einzuklonierenden Stückes DNA (engl. Insert) nicht vorkommen. Wird die zu klonierende DNA mittels Polymerase-Kettenreaktion (PCR) erzeugt, kann dies durch Verwendung von Oligonukleotiden (Primer) mit geeigneten Restriktionsschnittstellen erreicht werden. Eine weitere Möglichkeit besteht darin, Restriktionsschnittstellen durch Mutagenese des Plasmids zu entfernen.

Die MCS gehört zur Standardausstattung eines künstlich hergestellten Plasmids und enthält in der Regel 20 oder mehr verschiedene Schnittstellen.

Literatur

  • David P. Clark: Molecular Biology – Understanding the Genetic Revolution, Das Original mit Übersetzungshilfen. 1. Auflage, Elsevier, München 2006, ISBN 3-8274-1696-5.

Content Disclaimer

Informasi ini disarikan dari Wikipedia dan disajikan kembali untuk tujuan edukasi. Konten tersedia di bawah lisensi CC BY-SA 3.0. Kami tidak bertanggung jawab atas ketidakakuratan data yang bersumber dari kontribusi publik tersebut.

  1. The information displayed on this website is sourced in part or in whole from Wikipedia and has been adapted for the purpose of restating it. We strive to provide accurate and relevant information, however:
  2. There is no guarantee of absolute accuracy. Wikipedia is an open, collaborative project that can be edited by anyone, so information is subject to change.
  3. It is not intended to constitute professional advice. The content displayed is for informational and educational purposes only. For important decisions (e.g., medical, legal, or financial), please consult a professional.
  4. Content copyright. Wikipedia is licensed under the Creative Commons Attribution-ShareAlike License (CC BY-SA). This means that content may be reused with appropriate attribution and shared under a similar license.
  5. Responsible use. Any risk arising from the use of information from this website is entirely the responsibility of the user.